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| KinExA分子与完整细胞相互作用系统 |
1、与SPR的区别：SPR在芯片表面固定一个分子，通过芯片表明与溶液间二维相互作用的物质量改变而实现SPR检测。这就带来了非常显著的缺点：固定在芯片上的生物分子可能不能维持其天然活性、质量迁移影响动力学分析（例如，流速会影响实验结果）、被检测分子有分子量下限限制、非常大的分子或者生物结构其分子量有上限限制、样品需要纯化及无法检测完整细胞。相反，KinExA分析三维水平及游离状态相互作用，不固定任何分子、不会对平衡带来影响、没有质量迁移的限制、可以检测未纯化样品和完整细胞；因此，极宽范围内的生物分子、生物结构及完整细胞均可灵活分析。
应用一、KinExA在CAR-T细胞治疗中的应用
CAR-T细胞治疗产品的质量控制研究及检测项目一般应包括：细胞数量及其存活率、细胞表型、CAR阳性率检测、生物学效力检测，无菌检测、支原体、热原/内毒素的检测、CAR-T细胞中病毒载体拷贝数及整合的检测等。如果能够检测CAR-T细胞与抗原分子的亲和力，以及CAR-T细胞上抗体的表达量，无疑会提升CAR-T细胞的质量控制标准。
目前市面上除了KinExA技术外，没有其他特别有效的方式检测完整细胞与分子间的亲和力，更无从判断细胞上分子的表达量。KinExA技术可以检测细胞与分子间的亲和力，并且可以计算细胞上分子的表达量。其检测原理如下图，先将梯度稀释的细胞与恒定浓度的分子共同孵育达到平衡，离心之后收集上清液（此时上清液中只存在游离的分子），再通过已提前包被过的珠子捕获游离的分子，用荧光标签的抗体检测游离分子的量，通过检测器检测得到相应的数值后，利用KinExA系统软件进行数据分析。
国内某知名CAR-T公司通过KinExA技术检测CAR-T细胞与抗原分子间相互作用的结果表明，CAR-T细胞与抗原的亲和力Kd为45.41pM，T细胞表面CAR的表达水平为1.368e+5，Kd与EL的95%置信区间均较窄，数据非常准确可信。
应用二、KinExA在高亲和力检测上应用
对于抗肿瘤药市场，目前精准医疗最为成熟的领域还是以靶向药物为代表的抗肿瘤药物。由于单克隆抗体类抗癌药的副作用较小，且靶向性更好，因此，单抗药物仍将是引领抗肿瘤药物发展最为重要的领域。以PD-1为靶点的一类单抗药呈现出较高的亲和力，常规的相互作用检测系统例如SPR 、BLI、ITC等由于自身原理的限制均不能检测高亲和力（pM级别）。KinExA技术有别于常规的相互作用检测系统，能准确有效的检测高亲和力（fM级别）。 |
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